Avec sa belle victoire à l’extérieur contre Sapporo, c’est Fukuoka (6 points, +5) qui occupe la première place du classement, devant le Yokohama F.C. et Tokushima. Kataller Toyama était exempté pour cette 2e journée.
| 13 mars 2010 | |||
| Kusatsu | 0-1 | Ehime F.C. | |
| Sapporo | 0-3 | Fukuoka | |
| Kofu | 1-1 | Mito | |
| Okayama | 0-1 | Yokohama F.C. | |
| 14 mars 2010 | |||
| Tochigi | 0-0 | Kashiwa | |
| Tokyo Verdy | 1-2 | Kumamoto | |
| Kitakyushu | 1-3 | Tokushima | |
| Oita | 3-1 | F.C. Gifu | |
| Chiba | 2-0 | Tosu |